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《分子植物育种》印刷版, 2015 年, 第 13 卷, 第 21 篇 doi: 10.13271/j.mpb.013.001602
收稿日期: 2015年03月10日 接受日期: 2015年04月04日 发表日期: 2015年05月20日
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Tian X.Y., Shi L.S., Pan Y.W., and Liu J.P., 2015, Cloning and expression analysis of OnACO2 gene from Oncidium gower ramsey, Fenzi Zhiwu Yuzhong (Molecular Plant Breeding), 13(7): 1602-1610 (田晓岩, 石乐松, 潘英文, 刘进平, 2015, 文心兰OnACO2基因的克隆及表达分析, 分子植物育种, 13(7): 1602-1610)
乙烯对植物的许多发育过程如切花和果实衰老发挥重要的调控作用,而1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)氧化酶(ACO)是乙烯生物合成中的限速酶。本研究利用RACE技术克隆得到文心兰OnACO2基因(GenBank登录号为KP410730) cDNA,全长1 376 bp,推测为编码324个氨基酸的非跨膜蛋白,分子量为36 413.5,等电点为5.71。OnACO2蛋白的结构域包括DIOX_N和20G-FeⅡ_Oxy,与其它植物的ACO蛋白序列相似性在66%~91%之间。OnACO2基因原核表达获得了与理论分子量一致的重组蛋白。利用荧光定量PCR的表达分析结果表明,OnACO2在蕊柱中相对表达量最大,其次为花萼、侧瓣和叶片,最少的为根、茎和唇瓣。在文心兰切花衰老期间,OnACO2在花的不同部分中表达水平急剧升高,其后乙烯释放速率也对应地剧烈上升。OnACO2基因在文心兰花衰老过程中时空特异性表达表明,所克隆的OnACO2基因是一个对花衰老有作用的功能基因。OnACO2是文心兰品种抗衰老分子改良的重要候选基因,本研究结果可为文心兰切花衰老基因工程育种打下基础。